|
Министерство обороны РФ Центр судебно-медицинских и
криминалистических экспертиз
АКТ № 6/ген-2001 судебно-медицинского исследования вещественных
доказательств
15 мая 2002 года, г. Москва
На основании отношения Председателя Отдела религиозного образования и
катехизации Русской Православной Церкви архимандрита Иоанна (Экономцева) №
02-387-4 от 8 апреля 2002 года в лаборатории генетической идентификации
Центра судебно-медицинских и криминалистических экспертиз Министерства
обороны Российской Федерации в период с 09 апреля по 15 мая 2002 года было
проведено исследование частиц вещества бурого цвета. Представлены:
три ватных тампона, пропитанных маслянистым веществом, на поверхности
которых имеются наложения частиц вещества коричнево-бурого цвета (об. №№
1-3);
марлевый тампон, на поверхности которого имеются наложения частиц вещества
коричнево-бурого цвета (об. № 4);
вещество коричнево-бурого цвета в виде сухих порошкообразных частиц в
пластиковой пробирке типа Эппендорф (об. № 5).
Исследование
1. У становление наличия крови.
1.1. Установление наличия крови микроспектральным методом.
Частицы вещества коричневато-бурого цвета, представленные на исследование
(об. №№ 1-5), обрабатывались на предметных стеклах двумя способами:
1.1.1. Последовательно 33% раствором гидроокиси натрия и многосернистым
аммонием.
1.1.2. Концентрированной серной кислотой.
При микроспектральном исследовании во всех изготовленных препаратах (об. №№
1-5) выявлены спектры гемохромогена и гематопорфирина.
1.2. Установление наличия крови методом горизонтальной хроматографии.
Вытяжки из частиц вещества коричневато-бурого цвета (об. №№ 1-5), полученные
в результате экстрагирования в течение 18 часов в дистиллированной воде при
4 °С, наносились на стартовую линию пластины "Силуфол" в количестве 5 мкл с
последующим прогреванием при 100 °С в течение 15 мин.
В качестве "свидетеля" использовался 0,01% раствор крови.
Хроматографирование проводилось в течение 15 мин. в системе растворителя
н.бутанол-уксусная кислота-вода в соотношении 4:1:2 с предварительным
насыщением камеры и пластины парами растворителя в течение 5 мин.
Затем пластина высушивалась до исчезновения запаха уксусной кислоты и
последовательно обрабатывалась 1% раствором основного бензидина в этаноле с
добавлением уксусной кислоты (10:1) и 3% раствором перекиси водорода. В
результате исследования во всех вытяжках из частиц вещества
коричневато-бурого цвета (об. №№ 1-5) выявлены зоны синего окрашивания
вблизи линии финиша (на одном уровне с заведомой кровью).
2. Установление видовой принадлежности следов крови.
Видовую принадлежность крови устанавливали реакцией преципитации в жидкой
среде.
Исследовали вытяжки из частиц крови (об. №№ 1-5). Предварительно
концентрацию белка приводили к 1:1000 под контролем пробы с азотной
кислотой. Использовали сыворотки, преципитирующие белки крови человека,
мелкого рогатого скота и свиньи (соответственно серий 1, 31 и 79).
Сыворотки предварительно проверяли в отношении титра и специфичности. Титр
их 1:10000, и они специфичны.
При взаимодействии вытяжек с кровью (об. №№ 1-5) с сывороткой на белок
человека в течение первых 3-5 мин. образовались диски преципитации; с
сыворотками на белки мелкого рогатого скота и свиньи реакция была
отрицательной в течение 1 час. При взаимодействии всех трех сывороток с
вытяжками из контрольных (незапятнанных) участков предметов-носителей и с
дистиллированной водой, которой производилось экстрагирование, преципитации
не наблюдалось в течение 1 часа. Таким образом, в исследуемых следах крови
(об. №№ 1-5) выявлен белок человека.
3. Установление групповой принадлежности крови.
3.1. Обнаружение антигенов А и В.
Реакцию абсорбции-элюции проводили с предварительным извлечением антигенов
крови смесью органических растворителей.
Частицы крови (об. №№ 1-5) прогревались в микротермостате при 65 °С в
200-300 мкл смеси н.бутанол-метанол (2:1), после чего экстракты
центрифугировались при 10000 об/мин в течение 5 мин. и надосадочная жидкость
переносилась на нити стерильной марли длиной 5 мм путем многократного
наслаивания с периодическим высушиванием при 37 °С.
Аналогичным образом обрабатывались заведомо известные образцы крови групп 0,
А и В. Нити переносились в лунки планшетов для иммунологических реакций,
куда добавлялось по 80 мкл изогемагглютинирующих сывороток анти-А и анти-В
(соответственно серий 61 и 60 производства МГСПК) с титром 1:128. Абсорбция
проводилась при 4 °С в течение 3 час.
Абсорбированные сыворотки отсасывались, нити подвергались 6-кратному
отмыванию в охлажденном изотоническом растворе хлорида натрия и переносились
на предметные стекла, куда добавлялось по одной капле 0,5% взвеси
тест-эритроцитов групп А и В.
Препараты помещались во влажных камерах в термостат на 15 мин. при 50 °С для
проведения элюции антител. Результаты реакции учитывались микроскопически в
течение 1 часового пребывания препаратов при комнатной температуре.
В результате исследования установлено, что под влиянием сыворотки анти-А с
нитями марли, на которые были предварительно перенесены экстракты,
полученные при извлечении антигенов системы АВО из частиц крови (об. №№
1-5), смесью органических растворителей, наблюдалась агглютинация
тест-эритроцитов группы А и не наблюдалось таковой с тест-эритроцитами
группы В под влиянием сыворотки анти-В. Контрольные (незапятнанные) участки
предметов-носителей на применяемые сыворотки влияния не оказывал. Таким
образом, в частицах крови, представленных на исследование (об. №№ 1-5)
выявлен антиген А.
4. Цитологическое исследование.
Частицы крови из объектов №№ 4 и 5 помещали в пробирки и экстрагировали 10%
раствором уксусной кислоты в течение 20 часов.
Затем содержимое пробирок с образовавшимся осадком семь раз отмывали 10%
раствором уксусной кислоты с помощью центрифугирования по 5 мин при скорости
центрифуги 1500 об/мин.
Ресуспензированный осадок в виде капель переносили на предметные стекла,
обезжиренные смесью Никифорова. Мазки высушивались при комнатной
температуре, 15 мин. фиксировали метиловым спиртом и окрашивали 0,005%
раствором атебрина.
После ополаскивания проточной водой мазки исследовали с помощью
люминесцентного микроскопа РПО-11 с использованием объектива 40х, водной
иммерсионной среды.
При исследовании в препаратах из объектов №№ 4 и 5 обнаружены светящиеся
зеленоватым светом лейкоциты крови с пригодными для диагностики ядрами -
ядра с четкими контурами, неповрежденными оболочками и плотной хроматиновой
субстанцией.
При этом в 8 из 12 (объект № 4) и в 9 из 14 (объект № 5) обнаруженных в
исследуемых препаратах ядер гранулоцитов, найдены женские полоспецифические
отростки типа А (образования округлой, либо каплевидной формы, прикрепленные
к сегменту длинной хроматиновой нитью) и В (образования округлой, либо
каплевидной формы, прикрепленные к сегменту короткой хроматиновой нитью,
либо без нее), что указывает на происхождение клеток от лица женского
генетического пола.
Ярко флюоресцирующих глыбок округлой или серповидной формы - У-хроматина,
свойственного для мужского генетического пола, ни в одном из исследованных
ядер лейкоцитов обнаружено не было.
Таким образом, представленные на исследование частицы крови является кровью
от лица женского генетического пола.
Частицы крови на ватных тампонах (об. №№ 1-3) исследованию не подвергались
вследствие ограниченности подлежащего исследованию материала.
Выводы
1. На представленных для исследования трех ватных тампонах (об. №№ 1-3)
обнаружена кровь человека, при определении групповой принадлежности которой
выявлен антиген А, что не исключает происхождения этой крови от лица с
группой крови А.
2. На марлевом тампоне, и в веществе, находящемся в пробирке (об. №№ 4 и 5),
обнаружена кровь человека женского генетического пола. При определении
групповой принадлежности выявлен антиген А, что не исключает происхождения
этой крови от женщины с группой крови А.
Заведующий лабораторией судебно-медицинских экспертиз врач
судебно-медицинский эксперт С. Г. Харламов
Заведующая цитолабораторией врач судебно-медицинский эксперт Е. В.
Гургенидзе
Врач судебно-медицинский эксперт И. В. Верченко
***
исследовались образцы, взятые с кровоточивой иконы с кровоточивой иконы Матери Божией "Казанская"
|
